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 用水將稱取的約30mg試樣移入一個1000ml容量瓶中，用水定容后混勻。另稱取藥典級維生素B12參比標準樣，用水溶解，再用水逐步稀釋至濃度約為30μg/ml的標準溶液。以水作空白試驗，用適宜的分光光度計，同時測定在最大吸收波長處(約361nm)，1cm比色池中的兩溶液的吸光度。按下列公式計算試樣中維生素B12(C63H88CoNl4O14P)的含量(mg)。維生素B12的含量(mg)=C×Au/As式中c是參比標準液的濃度，其單位為μg/ml；Au和As分別為試樣液和參比標準液的吸光度。毒性GRAS(FDA，§182．5945，2000)。使用限量GB148Chemicalbook80—94：嬰幼兒食品、強化飲料10～15μg/kg。FDA，§184．1945(2000)：以(3MP為限。GB2760—2002(μg／kg)：軟飲料0.6～1.8；即食早餐谷物食品，5～10；果凍2.0～6.0；可可粉及其他口味營養型固體飲料，1～6.6(相應營養型乳飲料按稀釋倍數降低使用量)。食品添加劑最大允許使用量最大允許殘留量標準▼▲添加劑中文名稱允許使用該種添加劑的食品中文名稱添加劑功能最大允許使用量（g/kg）最大允許殘留量（g/kg）維生素B12運動營養食品營養強化劑0.4－10μg維生素B12兒童配方粉營養強化劑0.001~0.003mg/100g