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 鳥苷酸的生產方法有酶水解ＲＮＡ法、菌體自溶法、發酵法和化學合成法４種方法。鳥苷酸生產工藝目前運用最廣泛的是發酵轉化法，利用一定微生物，以Chemicalbook葡萄糖作為碳源生產鳥苷，再利用生物或化學方法將其轉化為鳥苷酸，如鳥苷磷酸化得鳥苷酸，且工業化生產鳥苷酸的方法就是采用鳥苷發酵的二步生產法。

化學合成法化學合成法通常是用焦磷酸或者磷酸的活性衍生物對核苷進行磷酸→酯化反應的方法。因為需要大量有機溶劑,存在環境污染及原料來源等問題，化學合成法在生產中也極少使用。發酵法發酵法生產鳥苷酸可分為2種方法：直接發酵法和發酵轉化法。直接發酵法利用一定數量微生物，以葡萄糖為碳源進行發酵得到鳥苷酸，Chemicalbook但此方法得到的鳥苷酸產量低，不能達到工業化要求。目前，運用最廣泛的方法是發酵轉化法，利用一定微生物，以多糖或葡萄糖作為碳源生產鳥苷，再利用生物或化學方法將其轉化為鳥苷酸。一般都是先對枯草芽孢桿菌進行斜面培養、種子培養以及發酵培養獲得鳥苷，再利用溶液與吡啶溶液制得鳥苷酸，反應式如圖所示。